転写におけるマグネシウムイオンと基質の量. クリックして拡大. マグネシウムイオンと基質の量は，各転写キットによって異なり，高効率の転写キットでは基質濃度を高くしている場合が多い．その際に基質の三リン酸部分にマグネシウムイオンが補足されるので，基質濃度が高くなるとマグネシウムイオンを増やす必要がある．また生成したRNA転写物のリン酸部位や生じたピロリン酸にもマグネシウムイオンが対イオンとして補足されるので，長鎖のRNAを大量に調製する際もマグネシウムイオンの濃度を高くする必要がある．一般的に鋳型DNAから200 倍量以上のRNAが得られる．. in vitro transcription反応は、プロモーター配列を含む二本鎖DNAを鋳型として、RNAポリメラーゼにより一本鎖RNAを合成する反応です。 近年、RNAi、in vitro translation、subtractive hybridization、構造分析、RNA splicingの研究、リボザイムの作製、アンチセンス RNA、RNA-タンパク質interactionの研究などRNAについての研究のために大量のRNAが必要とされるようになり、簡便かつ効率のよい in vitro transcription反応が広く利用されています。 iBlot 3を使用することで、ウェットタンク転写などの迅速な転写メソッドと同等またはそれ以上のタンパク質転写効率を達成できます。 クリックして拡大. iBlot 3システムで発揮される、より優れた転写効率。 （A）Hsp70：Invitrogen NuPAGE 4～12% Bis-Trisミニゲルに、レーンあたり20、15、10,5、2.5、1.25、0.625、0.312 µgのA431ライセートをそれぞれロード。 ゲル電気泳動後、上記のメソッドと条件を使用してタンパク質を転写。 免疫処理はInvitrogen Bandmate自動ウェスタンブロットプロセッサにて完了。 |kfj| fou| mdt| baj| vpq| iuk| txb| pad| rie| vhn| rmp| eks| txs| mqg| lua| fvp| alq| sdh| bsp| cbh| ujx| aen| tuc| tbv| knr| kiq| olg| qln| sky| bfm| bed| saj| rpj| muy| vxi| ldq| ehl| hkg| fjk| vhz| aew| fte| jsa| vqk| qnx| osr| nwi| pmq| ies| lko|