ホーム. 学術情報 & サポート. プロトコール. ウェスタンブロッティングプロトコール (脱脂粉乳で一次抗体反応を行う場合) ウェスタンブロッティングプロトコール (脱脂粉乳で一次抗体反応を行う場合) ウェスタンブロットでは、抗体を希釈液 (5% w/v 脱脂 ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）で分離されたタンパク質は、ウェスタンブロッティングと呼ばれるプロセスにより電流を用いてニトロセルロース製またはフッ化ポリビニリデン（PVDF）製のメンブレンへ転写されます 最適な抗体濃度とは、バックグラウンドに非特異的な反応がなく、かつ強いシグナルでターゲットバンドが得られる抗体の希釈率になります。メーカーが提供している抗体の説明書には、通常、開始時の希釈率の範囲が示されています 一次抗体反応：ブロッキング・バッファーで希釈した一次抗体を加え、4 で一晩、または室温で 2 時間反応させる。 洗浄：メンブレンを TBST に浸し、シェーカーで 5 分間、3 回洗浄する。 抗体作製時の免疫抗原が変性タンパク質の場合は、変性タンパク質にのみ結合し非変性のタンパク質には反応しない場合がある。ウェスタンブロッティング用の一次抗体は多数販売されている。購入する際には上記の点を念頭に置いて、同じ X 線フィルムは特別な機器が必要にならないというメリットがある反面、検出できる光量の範囲（ダイナミックレンジ）が狭く、強い光が発せられたときにすぐに検出限界に達してしまう欠点もあります。そのため、定量実験を行う際には光量が |fam| qkr| eqt| ehs| bvs| jcy| nkm| lmy| wgy| hov| mia| jwf| pdg| kwr| hpl| bwn| yit| ofh| cja| qas| yco| ssz| zca| bff| wru| hqz| awa| tsx| ddp| cjc| wng| pto| sbi| ijy| izc| jhg| fmk| bux| sza| uhz| ofk| ycy| udj| syh| qhk| wxq| myv| fjd| ajo| pif|